新鲜的蛋用作常规微生物检测的产品时,外壳不得有任何明显的裂纹。蛋可以根据检测的目的单独或组批检查。根据标准方法及检测目的要求,对蛋壳进行或不进行清洁/消毒。比如,当仅检测蛋的内容物时,在破壳前应对整蛋进行消毒;当检测致病菌(也可能在蛋的外壳发现)时,可能无需对蛋壳进行消毒。
消毒蛋壳时,应先以湿巾擦除表面的污物或粪便,并风干;再佩戴无菌手套,将蛋浸没在75%(体积分数)的酒精或异丙醇的水溶液中,用干净的纱布或布擦拭整个外壳表面,风干。这样的操作可在打开蛋取内容物时降低蛋黄和蛋白被污染的风险。
蛋和蛋制品不同部位和不同产品的样品制备操作如下:
(1）蛋壳
① 淋洗法
将整个完整的鸡蛋放在均质袋或其他无菌容器中,加入已知体积的检测所需的稀释液或培养基。将鸡蛋小心地在液体中旋转或按摩。然后无菌操作取出鸡蛋,将液体作为初始悬浮液进行检测。
② 摩擦法
使用浸泡有稀释液或其他所需培养基中的无菌纱布(或其他相当的织物/纸)。用无菌镊子捏住纱布擦拭整个蛋壳。然后将纱布放入规定体积的稀释液或培养基中。
③ 浸泡法
无菌打破蛋壳,将其放入碗内或烧杯中。保留蛋壳部分,将其放入动均质袋中,并加入所需体积的稀释液或培养基。用手按摩和压碎袋中的蛋壳,并将其此用作初始悬浮液。
(2）蛋内容物
将蛋打破并放入无菌容器中,对每个蛋的操作均应使用新的无菌手套。如需分开检测蛋黄和蛋白,则需将它们分开并放置于不同的无菌容器中。以蛋白胨盐溶液为稀释液,蛋黄以1∶10稀释,蛋白以1∶40稀释,以减低蛋类产品中天然存在的溶菌酶的抑制作用。若要检查整个蛋的内容物,应将所有的蛋黄和蛋白(约20mL)放入无菌容器中,加入180mL缓冲蛋白胨水,或其他方法标准制定的稀释液或浓缩溶液?以此作为1∶10的初始悬浮液。
(3）散装全蛋液、蛋清和蛋黄
散装全蛋液或蛋黄,用缓冲蛋白胨水1?10稀释;散装液体蛋清,使用缓冲蛋白胨水1 ∶10稀释,以减低天然溶菌酶的抑制。
(4）脱水干蛋和干蛋白
按脱水产品处理。
(5）整蛋(蛋壳加蛋黄加蛋白)
无菌操作打破鸡蛋,将外壳和内容物放入无菌塑料袋或其他适宜容器中。粉碎并摇动混合物,使其均匀,取所需的检测部分作为初始悬浮液。
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