农药残留——敌菌丹检测方法

1．分析目标化合物

敌菌丹

2. 仪器设备

    带电子捕获检测器的气相色谱仪和气相色谱--质谱仪

3.. 试剂

    磷酸盐溶液

    乙腈：取300 mL乙腈，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去乙腈；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5µL用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    丙酮：取300 mL丙酮，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去丙酮；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5µL用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    氯化钠：特级，如含有对该农药等成分物质分析有干扰作用的物质时，用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。
    色谱用合成硅酸镁：将柱色谱用合成硅酸镁（粒径150～250µm）130℃加热处理12小时以上，放干燥器中冷却。
    硅藻土：化学分析用
    乙酸乙酯：取300 mL乙酸乙酯，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去乙酸乙酯；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5µL用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    正己烷：取300 mL正己烷，用磨口减压浓缩器进行浓缩至5mL，取其5µL用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    水： 蒸留水, 如含有对该农药等成分物质分析有干扰作用的物质时，用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。
    无水硫酸钠：特级, 如含有对该农药等成分物质分析有干扰作用的物质时，用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。

4．标准品

    敌菌丹,含敌菌丹98％以上，熔点为159℃～161℃。

5．试验溶液的制备

a 提取方法 
    ①  谷类、豆类和种子类
    将样品粉碎，过420μm标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL 3%磷酸溶液，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30 mL。
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL 正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二次洗液于减压浓缩器中，40℃以下除去正己烷。
    残留物中加入30mL正己烷，移入100 mL分液漏斗中。加入30 mL正己烷饱和乙腈，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层以入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30 mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复2次，合并乙腈层于减压浓缩器中，40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。
    ②水果、蔬菜、末茶和啤酒花
    水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，加入500 mL 10％磷酸溶液，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。
    末茶：称取5.00g样品，加入20 mL 3％磷酸溶液，放置2小时。
    啤酒花：将样品粉碎，称取其5.00g，加入20 mL 3％磷酸溶液，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤至磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30 mL。
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL 正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以西洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二次洗液于减压浓缩器中，40℃以下除去正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。
    ③末茶以外的茶
    将9.00g样品浸泡于540 mL 100℃水中，室温下放置5分钟后，过滤，移取360mL冷却后滤液于500mL三角瓶中。
    加入30mL磷酸、100mL丙酮和饱和2 mL乙酸铅溶液，室温下静置1小时后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤至磨口减压浓缩器中，滤液移入1000mL分液漏斗中。再用50mL丙酮洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物。合并洗液于上述分液漏斗中。
    加入30g氯化纳和100mL正己烷，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入100mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二次洗液于减压浓缩器中，40℃以下除去正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。

b 净化方法
    在内径15mm，长300mm的色谱管中注入5g悬浮在正己烷中的柱色谱用合成硅酸镁，其上面再加入约5g无水硫酸钠,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液，注入100mL正己烷，舍弃流出液。再注入150mL乙酸乙酯及正己烷（1∶9）混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。残留物中加入正己烷溶解，准确至5 mL，此为试验溶液。

6．操作方法

a 定性试验
    按下列操作条件进行试验，试验结果应与标准品的一致。
    操作条件1：
    柱：内径0.25mm，长10-30ｍ石英毛细管，涂布0.25μm厚气相色谱用甲基硅酮，老化。
    柱温：在50℃保持1分钟，此后?胺种由??5℃。到达175℃后，?胺种由??0℃，到300℃后保持5分钟。
    进样器温度：230℃
    检测器温度：300℃
    气体流量：以氦气作载气，调整流速至适当条件。
    操作条件2：
    柱：内径0.25mm，长10-30ｍ石英毛细管，涂布0.25μm厚气相色谱用5%苯基--甲基硅酮，老化。
    柱温：在50℃保持1分钟，此后?胺种由??5℃。到达125℃后，?胺种由??0℃，到300℃后保持3分钟。
    进样器温度：230℃
    检测器温度：300℃
    气体流量：以氦气作载气，调整流速至适当条件。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同操作条件所得的试验结果，峰高法或峰面积定量。
c 确证检测
    按照与a 定性试验相同的操作条件，用气相色谱--质谱仪测定。试验结果应与标准品的一致。此外，必要时用峰高法和峰面积法进行定量。