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产气荚膜梭状芽孢杆菌的菌落计数法



录入时间:2013-11-28 13:07:39 来源:九鼎彩票平台生物

用有利于梭状芽孢杆菌恢复的培养基作为稀释液,制备待测食品的系列稀释液。用 无卵黄胰蛋白胨亚硫酸铁柠檬酸盐杯丝氨酸琼脂Shahidi和Ferguson多黏菌素卡那霉素亚硫酸盐琼脂或 新莓素血琼脂对系列稀释物进行平板计数。对于SICA和 SFA琼脂,既可采用加人lmL稀释液后倒平板的方法(lOmL培养基),也可在预先干燥 或倒好的平板上进行表面接种。新霉素血琼脂平板应预先倒好平板,干燥后进行表面接种。所有平板在35℃或37℃:厌氧培养24h在MCA和SFA琼脂上,可疑产气荚膜梭状芽孢杆菌的菌落延黑色的(亚硫酸盐还原 产生硫化铁沉淀)。在新霉素血(牛、马或人血)琼脂上,产气荚膜梭状芽孢杆菌的菌落产生-??琳?耐耆?苎??ㄐ纬啥舅兀??谌苎??庥中纬梢??琳?姆峭耆?苎??粞】梢傻牟??阅に笞囱挎吒穗【?洌?┐探又种梁??.3%琼脂的硝酸盐蛋白 胨水试管,也可以在Willis乳糖卵黄牛乳琼脂上划线接 种,预先将几滴产气荚膜梭状芽孢杆?的抗?贬磁缛髅扛銎桨宓囊话耄?稍?nbsp;后,在整个平板上划线接种。还可以将可疑菡落在血琼脂平板上划线。
将硝酸盐琼脂试管及Willis和fiobbs培养基置37℃厌氧培养24h。血琼脂平板置 于37℃需氧培养24h培养后,观察硝酸盐琼脂中菌体的生长情况(指菌体运动),并测试 硝酸盐的还原量选取Willis/Hobbs培养基上生长的菌株进行革兰氏染色后 镜检。产气荚膜梭状芽孢杆菌为革兰氏染色阳性、不运动杆菌,并能还原硝酸盐。通过以 下实验进行验证:①观察WmWHobbs培养基上的菌落——产气荚膜梭状芽孢杆菌在平 板无抗毒素的部分,菌落周围有一圈雾状带,在有抗毒素的区域不形成雾状带。另外该菌可发酵乳糖②在血琼脂需氧培养时,该菌不生长。

 

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